41005  10000*gelgreen 核酸染料 
一、产品基本信息
 
 灵敏 稳定的核酸凝胶染色试剂，是真正的EB替代品！
Gelgreen由美国BIOTIUM公司技术专家研发而成是一种集高灵敏、低毒素和超稳定于一身的极佳荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染
 
二、Gelgreen 相对其他燃料的优势
Figure 1. Comparison of GelGreen, SYBR Green 1 and SYBR Safe in post gel staining using 1% agarose gel in TBE buffer. Two-fold serial dilutions of 1 kb Plus DNA Ladder from Invitrogen were loaded onto each gel in 4 lanes in the amounts of 200 ng, 100 ng and 50 ng, respectively, from left to right. Gels were imaged using 254-nm transillumination and photographed with a SYBR filter and Polaroid 667 black-and-white print films.



Figure 2. Excitation and emission spectra of GelRed and GelGreen in the presence of DNA in PBS bufferFigure 2. Excitation and emission spectra of GelRed and GelGreen in the presence of DNA in PBS buffer

 
三、常见问题解答：
FAQs for GelRed＆GelGreen  
核心问题：  
Q: 关于一些客户，在预制琼脂糖凝胶中跑电泳时，marker条带跑不开，不清晰，分辨率低，拖尾等现象的解决方案。  
A：基本点:  
1. 拖带现象产生的一般原因：样品上样量过，marker量过多。  
2. Marker分辨率低的主要原因：
marker的加样量：marker有一个推荐浓度范围，选择 高的，样品与Marker 含量差别大, 也会造成条带错误（这不会是染料的问题，用EB也会存在该问题）。正确的DNA上样量是条带清晰的保证。Marker应该选择在目标片段大小附近的梯带较密的，这样比对才准确。另外注意的是，Marker的电泳条件也要符合DNA电泳的操作标准: 如果选择λDNA/EcoR I的酶切marker，需要预先65℃加热5min，冰上冷却后使用。从而避免Hind Ⅲ或EcoR I酶切造成的粘性接头导致的片段连接不规则或条带信号弱等现象。   
凝胶不平整：梳子不干净有污染，加样孔不平整也会影响图的效果；   
电泳条件：电压不稳，电泳时间不超过1h。电压过高，会导致小片段跑出胶， 出现条带缺失现象。   
缓冲液：TBE的缓冲能力更强，如果缓冲液缓冲性能下降，会导致DNA电泳条 带模糊，不规则迁移等。TAE建议换成TBE效果更好。另外建议配胶时的缓冲液和电泳缓冲液?同时配制。
染色剂：GelRed（312nm激发UV成像）无毒，性价比高，灵敏度比传统EB 高10倍以上，注意观察凝胶时应根据染料不同，使用合适的光源和激发波长，如果激发波长不对，条带出现模糊等情况。  PS：小片段的DNA样本，选择浓度百分比大点的gel；但是大浓度的胶对于分子大小相近的DNA条带不易分辨，容易造成条带缺失现象；  大片段的DNA样本，则选浓度百分比小点的gel，这样跑出的图分辨率高。  Marker跑不开：凝胶的浓度适当调低；电泳时间延长；电压稍微调高点。 
美国技术的答案：  
经过比对多家的maker产品，证实Invitrogens 1kb Plus DNA Ladder 与Gel Red匹配度 好。   Gel Red比EB分子大（也是由于大分子特性，所以不会透过细胞膜进入人体产生伤害，染料的结合原理都是一样的）。大分子的染料在预制胶中对DNA的迁移有一定影响，但是不确定对那种类型的DNA迁移影响严重。采用后染法，不会破坏胶中的DNA样本，保证了DNA迁移的真实水平。不同于EB，你不用在对染后的胶进行脱色。   
针对预制胶电泳拖带、不清晰的建议：  
1. 鉴于GelRed的高灵敏性，建议减少DNA的上样量。  
2. 建议把GelREed再稀释一倍后使用，但过低会影响结果的灵敏性。 
3. 用1XTBE缓冲液代替TAE，因为含硼酸盐的试剂导电性能更好
 四、相关产品
 
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B8040	Bis Benzlimide Hoechst NO33342 荧光染料	Sigma	25mg
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G1185	0.4%吕氏碱性美蓝染色液	100ml/500ml
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G1220	甲苯胺蓝溶液	100ml/500ml
G1260	饱和油红O染色液	100ml/500ml
G1270	亮绿SF染色液（1%）	100ml/500ml
G1310	中性红染色液(0.33% 过滤除菌，活细胞染色)	100ml/500ml
G1315	中性红染色液(0.5% 细胞或组织切片染色)	100ml/500ml
G1316	中性红染色液(0.1% 常规染色)	100ml/500ml
G3004	0.4% TTC染色液	100ml/500ml